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ChIP
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关于ag登录
公司称号:天德悦(北京)生物科技有限责任公司
### 公司网址:www.ffc978.cn                                            Email: >###            邮编:102299
公司>###36号院2号楼2层203            TEL:+8610-80117836                        

ChIP检测(Chromatin Immunoprecipitation ChIP         办事编号:FW02

第一局部:抗体IP验证

免疫沉淀(ImmunoprecipitationIP)

办事内容

1. 平和条件下举行卵白抽提,BCA定量,调解卵白浓度

2. 样品预处置:用Protein A/G Sepharose孵育

3. 样品与IP抗体举行孵育

4. 洗濯Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物举行变性处置

5. 沉淀产品SDS-PAGE大概WB判定(现在暂不提供另外判定)

6. Western blot检测

1 电泳:聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分散卵白样品

2 湿法转印(BLOTINGTank Transfer

3 杂交:用抗体判定膜上的特定卵白(INCUBATION: Antibody

4 化学发光检测(ECL),胶片曝光,TotalLab Quant软件读取IOD值(可选)

样品要求(样品处置及保管见附件)

1. 细胞>1×107;构造>30mg;细菌湿重50mg;动物>100mg;血清>50ul

2. 样品卵白浓度>1mg/ml,卵白量>500ug/样品

免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

免疫沉淀

7500/基因

3-4

免疫沉淀+可曝光marker

7800/基因

3-4

ImageQuant TL读取条带IOD值及盘算

!

客户提供质料

1 奇怪或准确保管的样品

2 目标卵白一抗

3 阳性比较样品(只管即便提供)

4 相干文献(可选)

提交给客户后果

1、预实行曝光后果(胶片及扫描图),预实行接纳2个一抗浓缩度

2、正式实行曝光后果(胶片及扫描图)

3、完备实行陈诉

4IOD值剖析陈诉(可选)

5、抗体能否可以实用于IP是举行ChIP的条件

办事阐明

1. 待检测样品可以是待检测卵白样品,也可以是细胞、构造等其他样品;

2. 免疫沉淀用抗体;

3. 检测用抗体;

4. 特异性二抗由天德悦(北京)生物科技有限责任公司提供;

5. IP检测可以不举行,但不克不及包管后续实行的后果。

比较设置

1 空缺:无抗体,只要protein A/G

2 阴性比较:无卵白,有抗体及protein A/G

3 阴性比较:未转染细胞大概基因敲除样品

4 有关空缺抗体

5、卵白裂解液上清:Input

 

  

第二局部

染色质免疫共沉淀(Chromatin ImmunoprecipitationChIP

办事内容

1. 样品甲醛交联牢固、停止、搜集样品、裂解样品

2. 超声大概酶解处置样品DNA成片断,琼脂糖电泳检测

3. 样品预处置:用Protein A/G Sepharose孵育

4. 样品与IP抗体举行孵育

5. 洗濯Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物举行变性处置,提取DNA样品

6. 检测

1 及时荧光定量PCR检测(最常用,收费检测)

2 DNA芯片检测(必要联系测试厂家,必要另付费。询价)

3 DNA产品测序(必要联系测试厂家,必要另付费。询价)

免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

ChIP

25000/基因

3-4

及时荧光定量RT-PCR

收费

2

 

客户提供质料

1、奇怪或准确保管的样品

2、目标卵白一抗,空缺大概阴性同种属IgG

3、阳性比较样品(只管即便提供)

4ChIP检测试剂盒

 

 

 
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