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关于ag登录
公司称号:天德悦(北京)生物科技有限责任公司
### 公司网址:www.ffc978.cn                                            Email: >###            邮编:102299
公司>###36号院2号楼2层203            TEL:+8610-80117836                        

◆免疫荧光

一、办事内容

1、对细胞内源性卵白的表达举行表达量和开端亚细胞定位察看

2、对在哺乳植物细胞中过表达的外源性卵白举行表达量和开端亚细胞定位察看

3、对细胞内两种内源性卵白举行共定位察看

4、对在哺乳植物细胞中过表达的两种外源性卵白举行共定位察看

5、细胞内源性卵白和外源性过表达卵白准确亚细胞定位察看(包罗细胞膜、线粒体、溶酶体、核膜、核仁等多种细胞器)

6、根本缄默结果检测

二、样品要求(样品处置及保管见附件)

1、细胞>1×107

2、特别培育条件的细胞请提供详细培育办法、血清和相干生长因子等

三、办事特点

1、探索每个卵白符合的抗体浓缩度

2、准确察看所表达卵白亚细胞定位状况

3、准确察看两种卵白在细胞内能否有共定位

四、免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

预实行

细胞培育

1500/细胞系

待定

细胞转染

3000/样品

1

一抗浓度探索

1000/抗体

1-2

多种一抗混淆孵育条件探索

2000/样品

2-3

荧灯光显示微镜照相

250/电影

2

正式实行

细胞培育

1500/细胞

待定

细胞转染

3000/样品

1

一抗单染

500/样品

1

一抗混淆染色

1000/样品

1

荧灯光显示微镜照相

250/电影

2

激光共聚焦显微镜察看共定位

500/电影

2

数据剖析

300/电影

1

五、客户提供质料

1、待检测细胞系和目标卵白信息(内源性卵白)

2、待转染质粒和菌株,以及目标卵白信息(外源性卵白)

3、目标卵白一抗

4、阳性比较样品(只管即便提供)

六、提交给客户后果

1、免疫荧光原始图片

2、两种卵白共定位图片

3、完备实行陈诉

 

 

◆串联亲和纯化技能(tandem afinity purificationTAP)挑选互相作用卵白

将带有TAP标签的交融卵白在细胞中表达,并与内源互相作用卵白构成复合物,细胞裂解后经FLAG标签亲和层析柱纯化,卵白AFLAG抗体特异联合,从而使含有标签的复合物失掉第一次纯化。将纯化后的含有靶卵白的复合物与层析柱分散,并颠末含有HA标签抗体的亲和层析柱举行第二次纯化,靶卵白上HA标签可与HA单抗联合,从而使含有HA标签的复合物失掉第二次纯化。再参加过量螯合剂后与亲和层析柱分散使含有靶卵白的复合体失掉分散纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),复合物中的各个卵白被离开,切胶、胰酶消化后,即可经过质谱判定复合物中与靶卵白互相作用各个卵白的氨基酸序列。

一、办事内容

1TAP标签的交融卵白表达载体的构建

2、细胞内源互相作用卵白的分散

3、质谱判定复合物中各个卵白的氨基酸序列

4、互相作用卵白细胞内验证(CoIP

5、互相作用卵白细胞外验证(GST pulldown

二、样品要求(样品处置及保管见附件)

1、相干基因载体或序列

2、待检测细胞系

三、办事特点

1、可失掉少量含靶卵白的复合体;

2、卵白表达及与复合物的联合都靠近心理程度,挑选的互相作用卵白阳性率高;

3TAP两步亲和纯化办法,进步了纯化产品的特异性。

四、免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

TAP亲和纯化互作挑选互作卵白

TAP标签质粒的构建(FLAGHA双标签)

6000/基因

3-4

TAP标签质粒的构建(别的标签)

请询价

2

TAP交融卵白纯化

6000/mg

2

细胞内源互作卵白的挑选

30000/样品

2

构造内源互作卵白的挑选

40000/样品

2

互作卵白的质谱判定

2500/样品

2

CoIP验证卵白互作

8300/目标卵白

3-4

Pull down验证卵白互作

请参考Pull down目次

4-6

五、客户提供质料

1、相干基因信息和细胞系培育条件

2、相干质粒信息和质粒> 100 μg

3、相干文献(可选)

六、提交给客户后果

1TAP标签质粒和甘油菌

2、质粒测序后果和碱基品貌图

3TAP交融卵白

4、互作卵白判定后果(质谱后果)

5CoIP后果(卵白纯化SDS-PAGE电泳图)

6Pull down (卵白纯化SDS-PAGE电泳图)

七、办事项目阐明

客户要求加可曝光marker的,需事前阐明,并依照可曝光项目免费

 

 

GST pulldown体外验证卵白互相作用

实行原理

将目标基因构建至GSTGlutathione S transferase)标签大概His载体上,经过诱导表达出GST标签大概His标签交融探针卵白。经过GST标签将交融探针卵白与层析柱上或固相化载体上的GTHGlutathione)亲和大概Ni填料亲和。当与交融探针卵白有互相作用的靶卵白经过层析柱或固相载体时就可被吸附而分散。从而在体外验证两个卵白能否有互相作用,大概寻觅大概与目标卵白有互相作用的靶卵白。

一、办事内容

1GST标签大概His交融卵白表达载体的构建和表达验证

2、验证交融探针卵白与未知(或靶)卵白间的新的互相作用

3、验证探针卵白与已知卵白质间可疑的互相作用

4、收费举行胞浆卵白内参检测(胞核卵白内参需收取用度)

二、样品要求(样品处置及保管见附件)

1、交融探针基因和靶基因载体>10μg,或甘油菌(-20摄氏度保管工夫不凌驾一年)

2、靶细胞>1×107

三、办事特点

1、探索每个基因符合的诱导表达条件

2、优化靶卵白与交融探针卵白共孵育条件

3、优化靶细胞裂解条件及与交融卵白卵白共孵育条件

四、免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

交融探针载体和靶基因载体构建

请参考载体构建办事目次

3-4

交融探针卵白和靶卵白诱导表达

4000/mg

3-4

靶细胞裂解条件探索

3000/细胞

2-3

Pull down验证卵白互作

15000/目标卵白

3-4

五、客户提供质料

1、奇怪或准确保管的卵白样品(间接举行pull down

2、探针基因和靶基因相干序列信息

3、靶细胞系培育条件

4、阳性比较样品(只管即便提供)

5、相干文献(可选)

六、提交给客户后果

1. 完备实行陈诉 (包罗详细实行步调和实行图片等)

2. 完备基因序列的质粒>10μg和载体甘油菌株

3. 完备测序陈诉和序列碱基图

4WB实行曝光后果(胶片及扫描图)

5IOD值剖析陈诉(可选)

七、办事项目阐明

客户要求加可曝光marker的,需事前阐明,并依照可曝光项目免费

 

 

◆流式细胞术细胞检测与分选

流式细胞术(flow cytometry)是使用流式细胞仪(flow cytometer)对对液流中排成单列的细胞或别的生物微粒(如微球,细菌,小型形式生物等)逐一举行疾速定量剖析、多参数剖析和分选的古代细胞剖析技能。

一、办事内容

1、特定范例细胞检测和剖析

1)检测药物处置和卵白表达对细胞周期调控影响

2)检测药物处置和卵白表达对细胞凋亡

3)检测药物处置和卵白表达对细菌生长、克制和毒力等的影响

2、对表达特定卵白细胞举行分选

1)单标志细胞检测和分选

2CD4/CD8阳性T细胞等多标志细胞的检测和分选

3)别的多标志细胞的检测和分选

二、样品要求(样品处置及保管见附件)

1、细胞>1×107;奇怪血液>10 mL

2、细菌单菌落或菌液

三、办事特点

1、丰厚的抗体单标志和多标志履历

2、短工夫内可举行少量细胞的检测和分选

3、专业的数据处置与剖析

四、免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

流式细胞术检测

细胞周期检测

400/样品

2-3

细胞凋亡检测

300/样品

2-3

细菌生长和克制检测

300/样品

2-3

流式细胞术分选

单标志细胞检测和分选

800/样品

3-4

多标志细胞检测和分选

请询价

3-4

五、客户提供质料

1、细胞>1×107和特别细胞培育条件

2、目标卵白一抗

3、阳性比较样品(只管即便提供)

4、相干文献(可选)

六、提交给客户后果

1、完备实行陈诉(包罗一维单参数直方图,二维点状图和圈门后剖析图等)

2、分选后的细胞(详细细胞数基本细胞品种而差别)

 

 
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